AccuLite H. pylori Genotyping Kit

Liên hệ

AccuLite H. pylori Genotyping

Đóng gói: 50 Test/bộ. Thể tích phản ứng đóng gói thực tế dư 20% (lên tới 60 Test) cho đối chứng

Phát hiện và định type Helicobacter pylori gây viêm và ung thư dạ dày từ mẫu sinh thiết dạ dày bằng kỹ thuật Multiplex PCR

Kit dùng cho mục đich phát hiện và phân biệt những chủng H. pylori độc và không độc.

Add to wishlist Add to compare

Đóng gói: 50 Test/bộ. Thể tích phản ứng đóng gói dự lên đến 60 test (Extra 20% cho chứng chuẩn, hao hụt)

Phát hiện và định type Helicobacter pylori gây viêm và ung thư dạ dày từ mẫu sinh thiết dạ dày bằng kỹ thuật Multiplex PCR

Kit dùng cho mục đich phát hiện và phân biệt những chủng H. pylori độc và không độc.

1. Thông tin tác nhân

Khoảng 90-95% các trường hợp loét tá tràng và 70-75% các trường hợp loét dạ dày được cho là do nhiễm xoắn khuẩn Helicobacter pylori (H. pylori). Từ năm 1994, H. pylori đã được Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) xếp vào nhóm I các tác nhân gây ung thư dạ dày, với hai dạng phổ biến là u lympho (lymphoma) và ung thư biểu mô tuyến (adenocarcinoma).

Các chủng H. pylori khác nhau có thể có độc tính khác nhau trong quá trình gây bệnh trên người. Nhiều gene của H. pylori được chọn để phát hiện sự hiện diện cũng như để đánh giá độc tính của vi khuẩn này trong bệnh phẩm như các gene rRNA 16S, cagA, vacA, urease, iceA và babA đã được xác định. Trong đó, hai gene cagA (cytotoxin-associated gene) và vacA (vacuolating toxin gene) được quan tâm nhiều nhất vì sản phẩm của chúng được coi là hai yếu tố độc lực đặc trưng có khả năng gây bệnh của vi khuẩn này. Sự kết hợp các type gene khác nhau giữa hai gene này có thể li n quan đến biểu hiện lâm sàng khác nhau ở người bệnh.

Gene cagA có thể hiện diện hoặc không hiện diện ở các chủng H. pylori: chủng có mang gene cagA (cagA+) và không mang gene cagA (cagA-). Sự hiện diện của gene cagA ở một chủng thường có liên quan đến những hậu quả lâm sàng nghiêm trọng cho người bị nhiễm. Protein cagA, có kích thước 128-140 kDa, có khả năng kích thích phản ứng phosphoryl hóa tyrosine trong tế bào ký chủ, dẫn đến sự tăng sinh bất thường của các tế bào biểu mô dạ dày, làm hỏng vùng niêm mạc dạ dày bị xâm nhiễm, gây viêm teo dạ dày, và là tiền đề quan trọng cho sự phát triển của ung thư dạ dày.

Gene vacA hiện diện ở hầu hết các chủng H. pylori, nhưng chỉ 50-60% gây độc. Protein vacA có trọng lượng phân tử vào khoảng 140 kDa, có khả năng cảm ứng hình thành không bào,chặn sự tăng sinh các tế bào T và ảnh hưởng đến phản ứng miễn dịch của cơ thể chủ dẫn đến tình trạng nhiễm dai dẳng. Độc lực cao hay thấp của protein phụ thuộc vào type gene của hai vùng biến đổi trên gene vacA là vùng “tín hiệu” và vùng “giữa”. Vùng “tín hiệu” có thể thuộc các type gene là s1 hoặc s2. Vùng “giữa” có thể thuộc các type gene là m1 hoặc m2. Chủng H. pylori với type gene s1/m1 cảm ứng tạo không bào mạnh hơn, làm gia tăng phản ứng viêm và có khả năng gây bệnh cao hơn các type khác.

Quan sát cho thấy những bệnh nhân ung thư dạ dày và loét đường ống ti u hóa có tần số cao vacA S1M1 và cagA dương tính.Việc phát hiện sớm H. pylori có thể giúp ngăn chặn các bệnh liên quan đến dạ dày. Rất nhiều phương pháp chẩn đoán đã được thiết lập để phát hiện H. pylori như nuôi cấy vi khuẩn, trắc nghiệm nhanh urease, nhuộm mô và nghiệm pháp thở. Tuy nhi n, nhược điểm lớn nhất của những phương pháp này là không thể phân biệt được chủng H.pylori độc và không độc. Trong khi đó, PCR ngoài việc dùng để phát hiện H. pylori với độ nhạy và đặc hiệu cao, còn được dùng để phân biệt những chủng H. pylori độc và không độc.

2. Thông tin kit

AccuLite H. pylori Genotyping Kit hoạt động dựa trên bốn bước chính: (1) Xử lý mẫu sinh thiết dạ dày; (2) Tách chiết DNA của H. pylori từ mẫu sinh thiết đã xử lý; (3) Nhân bản DNA của H. pylori bằng các cặp mồi đặc hiệu và (4) Phân tích kết quả trên gel agarose.
Quy trình có thể hoàn tất trong 8 giờ.

AccuLite H. pylori Genotyping Kit sử dụng 4 cặp mồi bắt cặp trên 4 vùng gene có chiều dài lần lượt là 401/476, 259/286, 349 và 200 bp của các gene vacA m1/m2, vacA s1/s2, cagA và Smad4 trong bộ gene của H. pylori và của người.

AccuLite H. pylori Genotyping Kit dựa trên kỹ thuật multiplex PCR, nhận biết các vùng gene đặc trưng của các chủng vi khuẩn này. Kit mang nhiều ưu điểm: dễ thực hiện, độ đặc hiệu và độ nhạy cao, cho phép định type gene cagA và vacA, có chứng nội và các đối chứng khác kiểm soát khả năng dương tính giả hay âm tính giả từng mẫu.

Kit có thể sử dụng cho công tác nghi n cứu, dịch tễ bệnh nhiễm do H. pylori. AccuLite H. pylori Genotyping Kit không phát hiện một số vi sinh vật khác như Shigella spp., Listeria spp., Vibrio cholera, Salmonella sp.

Độ nhạy của AccuLite H. pylori Genotyping Kit là 50 bản sao vi khuẩn, được xác lập trên mẫu vi khuẩn H. pylori chuẩn J99 (ATCC 700824) và Tx30a (ATCC 51932).